sdv.sa
Dr Hervé Ao 
  
Cochard 
  
Denise 
  
Seu Jaison 
  
Matheus Gabriel E Aos Pós-Graduandos Fernando Afonso 
  
Anderson Hawerroth 
  
Marafon 
  
Pesquisadores Da Embrapa 
  
Valtair Veríssimo 
  
Viviane Terra 
  
Francisco M Aos Pesquisadores Da Embrapa José 
  
Luis Eduardo Corrêa Pereira 
  
Silvio Antunes 
  
Carlos Reisser Steinmetz 
  
Ângela Junior 
  
Ivan Diniz 
  
Newton Alex Almeida 
  
Mayer 
  
Mathieu Alex Guillaume 
  
Christian, Stéphane Norbert Mathieu 
  
Eric Thierry Gilles 
  
Christophe Anaïs 
  
Pump), Thitithanakul (Fai), Isarangkool (Supat) e Junya Jate Nicolas 
  
Boris 
  
André, Boutheina, Hervé, Têté Boris Marc 
  
Fumanal 
  
Pierre 
  
Rémi 
  
Mustapha 
  
Hosaw Jean-Louis David 
  
Sylvie 
  
Patrice, Jun, Marine, Fanetre Dominique 
  
Ao Longo Dos Anos 
  
Rafael Robson 
  
Michél, Fernanda, Vanessa, Selbach, Rodrigo Marcio Tobias 
  
Renato Leo 
  
Viviane, Tiago, Yamamoto Andrea Ivan 
  
Matheus, Lu... Ana Paula 
  
Ao Professor 
  
Dr Da Pucpr 
  
Ruy Inacio 
  
Neiva De Carvalho 
  
Prof. Dr Examinadora 
  
Dr João Valmor 
  
Prof. Dr Bianchi 
  
Dr Inacio Ruy 
  
Prof Neiva De Carvalho 
  
Dr Gilles Pétel 
  
Dr Jean-Luc Regnard 
  
Dr Hervé Cochard 
  
Por Vossas 
  
Mr Jl Julien 
  
Dr Gilles 
  
Mathieu Ana Guillaume 
  
Philippe, Rémi, Remy, Genoviève, Mustapha, David Nicolas Pierre 
  
Jean-Louis Hosaw 
  
Jun Marine Patrice 
  
Le Dr 
  
E A Água 
  
Dos Dinâmica 
  
Durante Carboidratos 
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
  
CONTEÚDO DA

Start a new chapter Find what I'm after It's changing every day The change of the seasons Is enough of a reason To want to get away Quiet and pensive My thoughts apprehensive The hours drift away Leaving my homeland Playing a lone hand My life begins today

INTRODUÇÃO GERAL

Dados recentes apresentados na reunião internacional da água no Canadá em 2010 alertam que a demanda de água doce no mundo irá exceder em 40% o seu suprimento nos próximos 20 anos em função das mudanças climáticas e o crescimento populacional. Atualmente, metade da água doce disponível no planeta é utilizada. Em duas décadas, um terço da humanidade só terá metade da quantidade de água necessária às necessidades básicas. A produção mundial de alimentos no futuro está ameaçada pela crescente competição pela água, pelas práticas de irrigação e pelas mudanças climáticas.

O uso da água pelo setor agrícola mundial representa 96% do consumo, sendo preciso, de fato, uma ótima gestão deste recurso vital. A água na agricultura é o componente chave no seu avanço, pois permite grande aumento na produtividade, em especial das angiospermas, sendo assim sua importância econômica é fundamental, uma vez que inclui a maioria das espécies utilizadas pelo homem.

As angiospermas constituem uma das duas grandes divisões das plantas superiores. Elas compreendem grande diversidade de árvores, arbustos e espécies herbáceas, rasteiras e aquáticas e se distribuem por todo o mundo. Angiospermas são plantas extremamente importantes, principais produtoras dos ecossistemas terrestres, servindo para alimentação (frutas, grãos e vegetais), aplicações industriais (madeira), ornamentação (urbanização), fabricação de produtos farmacêuticos, e na ultima década tem-se discutido seu papel, como fundamental, na reciclagem do O 2 e CO 2 atmosféricos e regulação climática.

No entanto, alguns problemas ambientais são enfrentados por este grupo de plantas. Dentre os diversos fatores do ambiente, cuja disponibilidade, seja ela por excesso ou por escassez, pode caracterizar uma condição de estresse para o vegetal, destaca-se a água. A distribuição heterogênea seja espacial ou temporal deste recurso, influência as respostas dos vegetais em diferentes níveis. A compreensão de estratégias para absorção, transporte e eficiência do uso da água em condições de déficit hídrico é fundamental, quando se busca conhecer o potencial de sobrevivência e produção dos vegetais em condições limitantes.

Algumas espécies encontradas em ambientes com diferentes disponibilidades hídricas possuem diferentes características nas rotas de fluxos de seiva, buscando a maximização do transporte de água. Plantas que se desenvolvem em ambientes com alta disponibilidade hídrica têm o xilema dominado por elementos de vaso de grandes dimensões, o que proporciona aumento na eficiência de transporte de água.

Por outro lado, tais plantas apresentam maior vulnerabilidade a eventos de cavitação. Deste modo, sob condições de restrição hídrica, plantas que possuem elementos de vaso com diâmetro e comprimento reduzidos, parede celular espessa, pontuações de membrana com pequenas dimensões e mecanismos mais eficazes dos estômatos, apresentam vantagens adaptativas, tornando-as menos vulneráveis à cavitação, principalmente em cenários de mudanças climáticas.

Basicamente estudos de resistência à cavitação utilizam curvas de vulnerabilidade obtidas principalmente de três diferentes técnicas. O método de desidratação, que usa a transpiração foliar como um meio para a criação de potenciais negativos de pressão no xilema é considerado o pioneiro das técnicas e é classificado como confiável.

Outro método é a técnica de injeção de ar, na qual o ar comprimido (N) a partir de um reservatório, que atua no ramo por meio de uma luva de metal com duas extremidades fechadas com uma coleira de borracha em torno do mesmo. A técnica em geral tem concordância com os métodos de desidratação e centrifugação. Esta última, chamada de técnica de centrifugação por estática ou fluxo, consiste em gerar a cavitação por meio de forças centrífugas com tensões no interior do ramo conhecidas. No entanto, fica a pergunta: Quão confiáveis são os dados destas técnicas e qual a melhor maneira de construir curvas de vulnerabilidade à cavitação em angiospermas lenhosas?

Plantas lenhosas de clima temperado, em específico as frutíferas, enfrentam outros problemas ambientais durante sua parada de crescimento a partir do final do outono. O sucesso do cultivo de frutas de clima temperado adaptadas nas regiões de inverno ameno exige grande atenção nos tratos culturais para ótima formação da planta e o favorecimento à floração e frutificação. Dentre os principais tratos culturais, está a superação da dormência, especialmente as pomáceas, como pereiras e macieiras, cuja adaptação está mais sujeita às variações das condições de cultivo e climáticas.

A disponibilidade e o controle da distribuição de água e carboidratos nos tecidos das plantas frutíferas de clima temperado são os principais determinantes da sua produtividade. A brotação das gemas requer a importação de açúcares solúveis, provenientes da mobilização do amido dos tecidos, para sustentar a retomada do crescimento das gemas após a superação da endodormência. A dinâmica da água nos tecidos está relacionada à dinâmica dos açúcares solúveis, embora ocorra também a sua movimentação passiva a pequenas distâncias, por meio de difusão simples ou facilitada por proteínas de transporte da membrana. O conhecimento da dinâmica da água nos tecidos das plantas frutíferas de clima temperado é muito importante para a compreensão dos processos de mobilização de reservas e de ativação do metabolismo enzimático durante a endodormência e na fase de indução à brotação.

Dada a reduzida disponibilidade de informações referentes às características hidráulicas, entendendo que há variações da arquitetura hidráulica da planta dependendo de sua necessidade fisiológica e que a água no interior da planta é um fator determinante para superação da dormência, as hipóteses deste trabalho com angiospermas lenhosas foram que o conteúdo de água nos tecidos é um marcador das fases da dormência durante seu progresso. Plantas lenhosas apresentam comportamentos contrastantes na estratégia do uso da água sob o ponto vista hidráulico em reposta à seca induzida no solo. E por fim, diferentes comprime ntos dos vasos do xilema alteram resultados obtidos através da técnica de injeção de ar para determinação de curvas de vulnerabilidade à cavitação.

A tese foi estrutura em capítulos. Em primeiro lugar foi abordada a dinâmica da água perante o conteúdo de carboidratos durante o progresso da dormência em pereiras. Sob déficit hídrico induzido durante o verão do hemisfério norte, foi avaliada a estratégia de uso da água em duas frutíferas lenhosas sob o ponto de vista hidráulico das plantas, verificando -se se as mesmas adotam comportamentos contrastantes em resposta à seca no solo. E por fim, verificou-se a confiabilidade do uso da técnica de injeção de ar para determinação da vulnerabilidade à cavitação de três espécies de angiospermas lenhosas contrastantes quanto ao comprimento dos vasos do xilema.

O cultivo comercial da pereira no Brasil é pouco expressivo, abastecendo somente 10% do consumo interno (FAO, 2010), o que indica um grande potencial para expansão desta cultura. Dentre alguns fatores limitantes para maior exploração da cultura no país estão os baixos índices de floração e elevados índices de abortamento floral, os quais estão relacionados diretamente com a fase da dormência [START_REF] Nakasu | Pear flower bud abortion in southern Brazil[END_REF].

Para que a superação da dormência ocorra de maneira satisfatória, faz-se necessário acúmulo de determinada quantidade de horas de frio. A dormência das plantas lenhosas é um processo complexo que envolve mudanças metabólicas nos tecidos meristemáticos das gemas e regiões adjacentes [START_REF] Lang | para and ecodormancy: physiological terminology and classification for dormancy research[END_REF], onde interagem fatores como a regulação hormonal, eventos bioquímicos e a disponibilidade de água, nutrientes e carboidratos (CRABBÉ e BARNOLA, 1996).

O acúmulo de frio inadequado nestas plantas influencia os eventos bioquímicos, tal como a dinâmica dos carboidratos, principalmente durante a fase da endodormência (BONHOMME et al., 2000;CARVALHO e ZANETTE, 2004), causando respostas variadas de acordo com a espécie e local de cultivo [START_REF] Petri | Studies on the causes of floral abortion on japanese pear (Pyrus pyrifolia) in southern Brazil[END_REF].

Para que estes eventos bioquímicos aconteçam, a dinâmica da água tem um papel importante nas plantas lenhosas de clima temperado [START_REF] Lang | para and ecodormancy: physiological terminology and classification for dormancy research[END_REF], pois influência a mobilização de carboidratos durante as fases da dormência (BUCKHOUT e TUBBE, 1996;[START_REF] Marafon | Metabolismo de carboidratos, conteúdo de água e necrose floral em pereira (Pyrus sp.) em condições de falta de frio[END_REF]. Esta relação tem -se demonstrado importante na retomada do crescimento das gemas e estudos voltados a determinação do conteúdo de água nos tecidos durante a dormência em diversas espécies foram realizadas ao longo das últimas três décadas, em macieiras (YOUNG et al., 1987;[START_REF] Carvalho | Dinâmica da dormência e do conteúdo de carboidratos e proteínas em gemas vegetativas e ramos de um e dois anos de macieira com ou sem frio suplementar[END_REF], pessegueiros [START_REF] Cottignies | Teneur en eau et dormance dans le bourgeon de Frêne[END_REF]YOUNG et al., 1987;[START_REF] Marquat | Dormancy in vegetative buds of peach: relation between carbohydrate absorption potentials and carbohydrate concentration in the bud during dormancy and its release[END_REF][START_REF] Leite | Evolution des états des bourgeons et de leur hétérogénéité le long du rameau d'un an de pêcher sous différents régimes de températures après l'installation de l'endodormance[END_REF][START_REF] Leite | Evolution des états des bourgeons et de leur hétérogénéité le long du rameau d'un an de pêcher sous différents régimes de températures après l'installation de l'endodormance[END_REF]BONHOMME et al., 2005), pereiras [START_REF] Rakngan | Phenology and carbohydrate metabolism of Japanese pear trees grown under continuously high temperatures[END_REF][START_REF] Marafon | Metabolismo de carboidratos, conteúdo de água e necrose floral em pereira (Pyrus sp.) em condições de falta de frio[END_REF][START_REF] Yamamoto | Study on Dormancy Progression and Floral Primordia Abortion Occurrence in 'Housui' Japanese Pear Grown under Mild Winter Conditions[END_REF]), carvalho (MORIN et al., 2007), dentre outras espécies de interesse econômico.

O deslocamento da água dos tecidos adjacentes para a gema durante o período hibernal pode trazer conseqüências fisiológicas importantes, pois, juntamente com a água, reservas solúveis destes tecidos podem ser exportadas para tecidos da gema (AMÉGLIO et al., 2001;[START_REF] Carvalho | Dinâmica da dormência e do conteúdo de carboidratos e proteínas em gemas vegetativas e ramos de um e dois anos de macieira com ou sem frio suplementar[END_REF][START_REF] Marafon | Metabolismo de carboidratos, conteúdo de água e necrose floral em pereira (Pyrus sp.) em condições de falta de frio[END_REF] Existem poucos estudos em pereiras sobre a dinâmica da água e suas relações durante o progresso de dormência em condições naturais de inverno ameno. Em face disto, o objetivo foi caracterizar o conteúdo de água relacionado com a mobilização dos carboidratos nas gemas e tecidos adjacentes, durante o progresso da dormência, em pereiras européia e japonesa cultivadas sob condições climáticas distintas. Figura 1: Tecido do lenho e base da gema + gema, utilizados para determinação do conteúdo de água e de carboidratos.

MATERIAL E MÉTODOS

Material

Condições climáticas

Os dois locais onde foram conduzidos o experimento possuem clima com classificação do tipo Cfa de Köppen, caracterizado como subtropical úmido. As temperaturas máximas e mínimas diárias, bem como as horas de frio de ≤ 7,2°C (HF) acumuladas estão representadas na Fig. 2.

Tempo médio de brotação

Para a determinação do TMB foi utilizado o teste biológico de estacas de nós isolados, conforme metodologia descrita por [START_REF] Rageau | Croissance et débourrement dês bourgeons végétatifs de pêcher (Prunus persica L. Batsch) au cours d'un test classique de dormance[END_REF]. Cinco estacas de 7 cm do ápice dos ramos contendo somente a gema apical foram colocadas em bandejas de alumínio com esponja fenólica e água, e mantidas em câmaras de crescimento a temperatura (25°C ± 1°C e fotoperíodo de 16 horas).

Os testes foram realizados com cinco repetições de cada planta, totalizando 25 estacas por cultivar de cada região e 50 estacas por época de coleta. As avaliações foram realizadas a cada dois dias até o aparecimento de pontas verdes nas gemas. Com base neste parâmetro foi determinado o TMB, que consiste no número médio de dias passados entre a instalação do experimento em cada data de coleta e a detecção do estádio de ponta verde, podendo ser calculado pela fórmula:

∑

(1) sendo, TMB = Tempo médio de brotação, n i = número de gemas brotadas no tempo, t i = tempo decorrido após a data da colocação na câmara até a data da brotação (ponta verde), em dias, e n = número total de gemas brotadas para cada data de coleta.

Determinação do conteúdo de carboidratos

Foram utilizados 300 mg das amostras secas e moídas em moinho tipo Willey (TE-650, Tecnal) dos tecidos lenho e base+gema. A extração dos açúcares foi realizada de acordo com [START_REF] Irigoyen | Water stress induced changes in concentrations of proline and total soluble sugars in nodulated alfalfa (Medicago sativa) plants[END_REF] a partir das amostras alocadas em tubos com 5 mL de etanol 80%, que foram colocados em banho-maria por 10 min e centrifugados a 6000 rpm por 10 min. Este procedimento foi repetido por mais duas vezes. Os sobrenadantes foram transferidos para balões volumétricos de 50 mL, onde foi completado o volume com água destilada. Esta amostra líquida foi utilizada para a determinação do conteúdo de açúcares solúveis totais (AST).

O precipitado foi separado e seco em estufa a 65°C por 48 h para ser utilizado na determinação do conteúdo de amido, baseado na metodologia desenvolvida por [START_REF] Mccready | Determination of starch and amylose in vegetables Analytical Chemistry[END_REF] e readaptado por [START_REF] Osaki | Redistribution of carbo n and nitrogen compounds from the shoot to the harvesting organs during maturation in field crops[END_REF]. O precipitado (± 300 mg) foi ressuspenso em 5 ml de ácido perclórico (HClO 4 ) 30%, agitado por 15 s e adicionados 5 mL de água destilada. Em seguida, as amostras foram colocadas em banho-maria a 80°C por 10 min e centrifugadas a 6000 rpm por 10 min. Este procedimento foi repetido mais uma vez. Os sobrenadantes foram transferidos para balões volumétricos de 50 mL, onde foi completado o volume com água destilada.

As determinações do conteúdo de carboidratos foram realizadas pelo método de solução antrona 0,1%, H 2 SO 4 [START_REF] Dische | General colors reactions In[END_REF]. Foram utilizadas alíquotas de 100 µL do sobrenadante de cada amostra, além de uma replicata da mesma. As leituras de absorbância foram efetuadas através de espectrofotômetro tipo UV/VIS (modelo UV-160, Shimadzu Co, Kyoto, Japan) a 620 nm, e os resultados foram expressos em mg g -1 DW.

Conteúdo de água nos tecidos

A determinação do CA nos tecidos base+gema e lenho foi realizada após secagem das amostras sob ventilação forçada, em estufa a 70°C por 72 h, de acordo com a fórmula:

(2) sendo, CA = Conteúdo de água, MF = Matéria Fresca e MS = Matéria Seca.

Delineamento experimental

Para A cv. Packham's Triumph apresentou diferenças no TMB em relação aos locais de cultivo (Fig. 3A). Em geral, para esta cultivar, as plantas apresentaram maior profundidade de dormência em Vacaria/RS. Observou-se que o TMB no final da endodormência para as plantas cultivadas em São Joaquim/SC foi de 20 dias, enquanto que em Vacaria/RS foi de 30 dias. Para cv. Housui (Fig. 3B), o TMB demonstrou que o final da endodormência ocorreu em 23/mai para ambas regiões.

No entanto, observou-se em 26/jul um aumento na TMB em Vacaria/RS, diferindo em 4,4 dias em relação a São Joaquim/SC.

Açúcares solúveis totais

Em geral a dinâmica foi semelhante entre as cultivares, locais e tecidos estudados (Fig. 4 houve aumento de 52% de AST nas gemas entre 14/jun e 05/jul, seguido de queda expressiva de 76% em 26/Jul em relação à coleta anterior (Fig. 4A). Esta variação expressiva ocorreu somente para esta cultivar em São Joaquim/SC. A dinâmica dos AST no lenho da cv. Packham's Triumph foi semelhantes entre locais de cultivo, onde observou-se queda de aproximadamente 65% entre 5/Jul e 26/Jul (Fig. 4C).

Na cv. Housui os AST tiveram dinâmicas semelhantes tanto nas gemas (Fig. 4B) quanto no lenho (Fig. 4D). Nas gemas observa-se que o pico no conteúdo de AST foi de 105 mg.g -1 MS em 5/jul e para o lenho o AST atingiu aproximadamente 70 mg.g -1 MS para ambos locais de cultivo. Após esta data, ambos tecidos sofreram queda nos AST até a brotação. Os teores de amido no lenho da cv. Packham's Triumph apresentaram queda de aproximadamente de 30% nos dois locais de cultivo até 05/jul, e posteriormente observou-se aumento de 45% até 16/ago (Fig. 5C). O conteúdo de amido na cv.

Housui aumentou (São Joaquim/SC) ou manteve-se inalterado (Vacaria/RS) na fase inicial seguido de queda a partir de 14/Jun (Fig. 5D). Após 5/jul seu conteúdo 

DISCUSSÃO

Os principais eventos neste experimento ocorreram no mês de julho, período que coincidiu com a ocorrência das altas temperaturas (Fig. 2) e com o final da endodormência (Fig. 3) nas duas cultivares e em ambos locais, com exceção da cv. [START_REF] Herter | Determinação do término da dormência e floração para algumas cultivares de macieira: comparação entre métodos biológico e empírico[END_REF]. [START_REF] Carvalho | Dinâmica da dormência e do conteúdo de carboidratos e proteínas em gemas vegetativas e ramos de um e dois anos de macieira com ou sem frio suplementar[END_REF], trabalhando com macieiras, também observou que a baixa ocorrência em frio natural contribuiu para o estabelecimento de uma dormência profunda. [START_REF] Rakngan | Phenology and carbohydrate metabolism of Japanese pear trees grown under continuously high temperatures[END_REF], descrevem que geralmente, o amido é o carboidrato de reserva mais abundante em plantas de pereira durante o período de crescimento vegetativo, que é hidrolisado a glicose após e durante o inverno, como forma de proteção ao frio [START_REF] Cottignies | Teneur en eau et dormance dans le bourgeon de Frêne[END_REF]. Eles também relataram as tendências de que os AST e amido seguem um padrão inverso, sugerindo uma interconversão, ou seja, quando o crescimento é reiniciado. Esta inversão também foi observada por Sauter et al. (1988a;1988b), que relata que a conversão do amido em AST foi induzida nas células de armazenamento do parênquima do xilema, em ramos isolados de álamo (Populus sp.) submetidos à baixa temperatura. No entanto, após a superação da endodormência, as gemas se tornariam drenos metabólicos preferenciais, aumentando a importação de açúcares, por meio de transporte ativo, os quais são metabolizados para o fornecimento de energia e a biossíntese de precursores carbônicos durante a fase de indução à brotação [START_REF] Marquat | Dormancy in vegetative buds of peach: relation between carbohydrate absorption potentials and carbohydrate concentration in the bud during dormancy and its release[END_REF].

Housui em

A retomada do crescimento coincidiu com a queda dos AST (Fig. 4 A hipótese de que o conteúdo de água nos tecidos possa ser utilizado como um marcador do progresso da dormência parece ser válida para cv. Packham's

Triumph, pois os resultados demonstraram que na retomada do crescimento observou-se aumento expressivo do CA em gemas para plantas cultivas em São Joaquim/SC, dando-se inicio à brotação.

CONCLUSÃO

O aumento do conteúdo de água na base da gema + gema na cv. Packham's

Triumph parece ser um elemento de validação da hipótese de que a água seja um marcador do progresso da dormência, sendo ela um marcador da retomada do [START_REF] Sperry | Intra and inter-plant variation in xylem cavitation in Betula occidentalis[END_REF]BRODRIBB e HILL, 2000;[START_REF] Lemoine | Within crown variation in hydraulic architecture in beech (Fagus sylvatica L.): Evidence for a stomatal control of embolism[END_REF][START_REF] Ennajeh | Water relations and drought-induced embolism in olive (Olea europaea) varieties 'Meski' and 'Chemlali' during severe drought[END_REF]. Sendo assim, o fechamento dos estômatos está diretamente correlacionado à perda de condutividade hidráulica na planta (COCHARD, 2002;BRODRIBB et al., 2003;[START_REF] Nardini | Xylem cavitation in the leaf of Prunus laurocerasus and its impact on leaf hydraulics[END_REF].

Com base na teoria da relação entre o fechamento estomático e perda da condutividade hidráulica em função do potencial hídrico da planta, o objetivo deste estudo foi investigar a adaptação e a resistência à seca em duas espécies frutíferas de grande importância econômica, a macieira e a nogueira, sendo elas diferentes do ponto de vista hidráulico em relação à necessidade de água em face de três ciclos de déficit hídrico no solo.

MATERIAL E MÉTODOS

Local e material vegetal do experimento

A pesquisa foi realizada em Clermont-Ferrand, França (45°77'N, 3°14'E), no laboratório integrado física e fisiologia de árvores frutíferas e florestais (PIAF), durante o ciclo vegetativo de 2009 no hemisfério norte.

Seis plantas de macieira (Malus domestica Borkh.), cv. Fuji sobre portaenxerto M9, com três anos de idade foram transplantadas para vasos de 35 L e seis plantas de nogueira (Juglans regia L.), cv. Franquette sobre porta-enxerto selvagem, de três anos de idade para vasos de 80 L. Os vasos foram preenchidos com uma mistura de substrato arenoso (66% de solo virgem arenoso e 34% de turfa) e protegidos com um filme plástico branco para impedir a precipitação, a evaporação e o aquecimento solar.

As 

Regime hídrico

No início do experimento todos os substratos contidos nos vasos foram colocados na capacidade de campo. Após este procedimento, as plantas foram submetidas a quatro tratamentos distintos, sendo eles: tratamento controle, correspondente a três plantas de cada espécie irrigadas diariamente por sistema de gotejamento, e outro denominado de tratamento seco, que correspondendo a três plantas de cada espécie, que foram irrigadas sob três níveis de déficit diferentes no solo, sendo um fraco (≈ 75% transpiração controle), um moderado (≈ 50% transpiração controle) e um severo (≈ 0% da transpiração controle).

Para o tratamento seco, a irrigação era encerrada nas primeiras horas da manhã, dando-se início ao nível desejado de déficit hídrico no solo. Após as plantas atingirem ≈ 75%; ≈ 50% ou ≈ 0% da transpiração controle, reiniciava a irrigação até o momento em que estas apresentavam transpiração semelhante ao tratamento controle, monitorada pelo fluxo de seiva no tronco diariamente.

Após a instalação dos regimes hídricos as seguintes variáveis abaixo foram analisadas durante o experimento, correspondente de 27/julho a 24/agosto.

Umidade do solo

A umidade do solo foi mensurada com uma sonda TDR MiniTrase (Soil Moisture Equipment Corp., Santa Barbara, CA) diariamente durante o experimento às 14h, numa profundidade de 15 cm, distante 25 cm do tronco e em três pontos distintos de cada vaso.

Estimativa da área foliar

Durante o experimento, semanalmente, foi realizado a contagem de número de folhas por árvore de cada espécie. Ao fim do experimento foram coletadas 50 folhas ao acaso de cada árvore e determinou-se a área foliar utilizando um medidor de área foliar de bancada modelo (Li-Cor 3100C , Lincoln, Nebraska, USA). A estimativa da área foliar de cada espécie foi realizado através do produto da média da área foliar de uma folha e da média do número total de folhas durante o experimento.

Fluxo de seiva

Para cada planta a transpiração foi estimada a partir de medições diárias do fluxo da seiva no interior do tronco, por meio da técnica do balanço de calor de Valancogne e Nasr (1993). Os dados provenientes de cada planta foram coletados usando um datalogger (DL2 model: Deta-T Devices, Cambridge, UK), sendo que todas as medições foram feitas a cada 30 segundos e média a cada 10 minutos.

Potencial hídrico e trocas gasosas

O potencial hídrico mínimo do xilema ( min ) foi mensurado usando uma câmara de pressão tipo [START_REF] Scholander | Sap pressure in vascular plants[END_REF]. Três folhas por planta foram removidas para obter o  min . Estas medidas foram obtidas entre 12h e 14:00h. As pressões do xilema foram estimadas pela medida do potencial hídrico de folhas cobertas com papel alumínio e fechadas com saco plástico 6h antes [START_REF] Turner | Techniques and experimental approaches for the measurement of plant water status[END_REF][START_REF] Wei | Direct measurement of xylem pressure in leaves of intact maize plants. A test of the cohesion-tension theory taking hydraulic architecture into consideration[END_REF].

Ao mesmo tempo, foi mensurada a condutância estomática (gs), com um porômetro portátil (Li-Cor 1600, Lincoln, Nebraska, USA). As medidas de condutância estomática foram obtidas de três folhas expostas ao sol completamente expandidas selecionadas ao acaso.

Após, as curvas da condutância estomática das folhas vs potencial hídrico do xilema foram sobrepostas nas curvas de vulnerabilidade a cavitação, representadas pela porcentagem perda de condutividade hidráulica (PLC) das macieiras e nogueiras.

Embolia do xilema e curvas de vulnerabilidade

Cinco ramos de cada macieira expostos ao sol e na altura mediana da planta foram coletados para determinação das curvas de vulnerabilidades (CV). Os ramos foram acondicionados em sacos plásticos pretos durante o transporte até ao Laboratório de Água do INRA-PIAF (Lab'Eau). Cada ramo foi reduzido a 37 cm de comprimento e tiveram suas extremidades cortadas com lâminas de corte preciso, com objetivo de manter os vasos do xilema abertos em ambas as extremidades.

A embolia do xilema foi quantificada mesurando a porcentagem de perda de condutividade hidráulica (PLC) de cada ramo com valores do potencial hídrico do xilema ( xil ) induzidos, a qual causa bloqueios da seiva com bolhas de ar no xilema [START_REF] Sperry | A method for measuring hydraulic conductivity and embolism in xylem[END_REF]. O valor obtido para a PLC é uma estimativa indireta do percentual da cavitação nos vasos do xilema (COCHARD et al., 2000). A vulnerabilidade à embolia do xilema das macieiras foi avaliada utilizando a técnica CAVITRON (COCHARD, 2002;COCHARD et al., 2005).

A técnica consiste em submeter os ramos com 37 cm sob diversas pressões negativas geradas gradativamente através da força centrifuga imposta no centro do ramo com o uso de um rotor. Após a alocação do ramo no rotor, suas extremidades foram imersas em água desgaseificada durante a centrifugação gerando então, a vazão desta água de uma extremidade para outra com uma determinada velocidade, a qual depende da rotação (pressão) aplicada. A PLC foi então calculada como:

PLC 100

( max ) (1) 
onde, PLC = porcentagem de perda da condutividade hidráulica; K = condutividade hidráulica e K m ax = condutividade hidráulica máxima (inicial).

As CV para macieiras foram ajustadas usando a seguinte função sigmóide (2) onde, PLC = porcentagem de perda da condutividade hidráulica; e = 0,5; S = inclinação da reta (slope); P = pressão do xilema; P 50 = pressão que provaca 50% de PLC.

A CV para nogueira foi obtida dos dados publicados por Cochard et al. (2002), dispensando a geração de dados para realização das curvas para este experimento.

A porcentagem de perda da condutividade hidráulica em 12% foi calculada como:

P 12 P 50 50 s

(3)

onde P 12 = 12% de perda condutividade hidráulica; P 50 = 50% de perda de condutividade hidráulica e S = inclinação da curva obtida (slope).

Delineamento estatístico

O efeito da seca sobre as variáveis medidas foi determinado através da análise de variância (ANOVA) para blocos inteiramente casualizados.

RESULTADOS E DISCUSSÃO Umidade do Solo

A Fig. 2 mostra a evolução da umidade do solo durante os três ciclos de déficit hídrico aos quais as plantas foram submetidas. Observa-se que o consumo de água no solo pelas macieiras durante o período de déficit hídrico ocorreu de forma controlada e gradativa. O contrário ocorre nas nogueiras, que no terceiro dia após o início do estresse severo, revelou valores de umidade no solo próximos aos do último dia de estresse do ciclo. Isto não pode ser atribuído a diferença de área foliar das plantas, pois as macieiras apresentaram média de área foliar total de 1,72m² e as nogueiras de 4,20m². A diferença de área foliar entre as plantas de 59% foi compensada com a diferença de volume entre os vasos de cultivo de 56%.

Conseqüentemente, esta diferença disponibilizou maior conteúdo de água no solo para as nogueiras, onde também pode ser observado nas Fig. 3 e 4, que os picos diários de transpiração, que ocorrem entre as 12:00 e 14:00h, são semelhantes no dia 6/ago, por exemplo, atingindo valores próximos a 4,5 cm 3 .mn -1 .

Figura 2: Evolução da umidade do solo durante os três ciclos de déficit hídrico implementados em vasos com macieiras e nogueiras.

As mesmas condições de cultivo e disponibilidade de água no solo. Baseado nisto, a macieira conduziu uma estratégia mais segura de absorção da água no solo evitando sua desidratação severa.

Fluxo de seiva

As figuras 3 e 4 apresentam fluxo de seiva diário no tronco representado pela transpiração (cm 3 .mn -1 ) das plantas, e a taxa de radiação fotossinteticamente ativa, durante os três ciclos de seca submetidos, baixo (≈75%), moderado (≈50%) e severo (≈0%).

Figura 3: Fluxo de seiva diário de macieiras submetidas a três ciclos diferentes de déficit hídrico no solo ( __ ) e sem déficit hídrico no solo ( __ ). Radiação fotossinteticamente ativa máxima diária ( __ ). RH: Reidratação. A transpiração das macieiras possivelmente foram menos afetadas durante um ciclo de estresse baixo, mesmo depois de um ciclo de estresse severo. Pois se observa que a transpiração nestas plantas esta próxima da transpiração controle.

Logo as nogueiras apresentam uma queda abrupta da transpiração nas 48 horas precedente, bem como durante os outros dois ciclos de estresse.

A ocorrência de valores de fluxo na falta de iluminação é justificável, pois representa a fase de dinâmica hídrica diária na qual a planta se recupera da perda diurna de água (KRAMER e BOYER, 1995), em conseqüência da maior transpiração em relação à absorção nesse período. Desse modo, os tecidos do caule e ramos, além das folhas, recuperam sua turgescência. Essa dinâmica explica as variações micromorfométricas em escala diária, uma das quais é o processo de contração/expansão radial dos ramos e caules [START_REF] Rojas | Avaliação do uso do fluxo de seiva e da variação do diâmetro do caule e de ramos na determinação das condições hídricas de citros, como base para o manejo de irrigação[END_REF].

Vulnerabilidade à cavitação e o fechamento estomático

Para investigar o papel que os estômatos podem ter na limitação da cavitação no xilema, foram plotados os dados de gs e as CV em função do  xil (Fig. 5). próximo a zero (0) a inclinação mais resistentes à seca é a espécie e quanto mais próximo aos 100 mais suscetíveis as espécies são à cavitação. [START_REF] Rood | Branch sacrifice: cavitationassociated drought adaptation of riparian cottonwoods[END_REF] descrevem que a cavitação é uma séria ameaça para as plantas, prejudicando o xilema e perdendo a capacidade condutora da seiva, podendo eventualmente levar a folha à dessecação e à morte do ramo.

Normalmente, quando as funções transpiratórias estomáticas foliares excedem a absorção de água na planta pela raiz, os estômatos fecham-se para manter o equilíbrio hídrico. Este equilíbrio é essencial para o desenvolvimento da maior parte dos processos fisiológicos e metabólicos da planta, como as trocas gasosas e conseqüentemente a assimilação fotossintética do CO 2 [START_REF] Zeiger | Stomatal Function[END_REF].

Observa-se que para ambas espécies os estômatos estavam quase fechados antes da formação de embolia danosa (PLC <10%), sugerindo que estômatos participam do controle da embolia no xilema . Resultados similar foi revelado em seringueiras [START_REF] Sangsing | Xylem embolism and stomatal regulation in two rubber clones (Hevea brasiliensis Muell. Arg.)[END_REF]. Vários mecanismos podem estar implicados para explicar este comportamento, entre os quais a função estomática. Os estômatos são os locais principais de perda d'água na planta e seu funcionamento é determinante para a gestão deste recurso (COCHARD et al., 2002) e certamente correlações entre o fechamento e a cavitação existem [START_REF] Cruiziat | The hydraulic architecture of trees: main concepts and results[END_REF]COCHARD et al., 2005).

Baseado Waterbury, v.128, p.282-290, 2002.

Introduction

In plants, sap is transported under large negative pressures in specialized conduits that form the xylem tissue.

Water is a metastable liquid when its pressure is negative but it can suddenly change to a more stable gaseous phase by cavitation. Cavitation provokes embolism, which means it breaks the integrity of the water columns in the xylem pipes and consequently impairs the mechanisms enabling sap to ascend from soil to leaves. Cavitation has major physiological consequences as it can eventually lead to shoot or tree mortality by desiccation [START_REF] Brodribb | Hydraulic failure defines the recovery and point of death in water-stressed conifers[END_REF], prompting a major research push over the last three decades attempting to characterize and understand xylem hydraulics in trees. These efforts have not yet turned toward herbaceous plants (Martre et al. 2000(Martre et al. , 2001)).

Abbreviation -VCs, vulnerability curves. † These authors have contributed equally to this work.

The very peculiar physical state of water in the xylem makes cavitation extremely difficult to observe and quantify. Many different techniques have been proposed for constructing xylem vulnerability curves (VCs). These techniques differ by the way cavitation is induced (air dehydration, air pressurization, centrifugation, etc.) and measured (direct observation, loss of conductance, acoustic emission, etc.). Some techniques are presumed reliable (e.g. the air dehydration and declining conductivity technique of [START_REF] Sperry | A method for measuring hydraulic conductivity and embolism in xylem[END_REF]) whereas many others have proven to be flawed. For instance, [START_REF] Canny | Vessel contents during transpiration: embolisms and refilling[END_REF] observed the content of frozen xylem vessels under a cryo-SEM and suggested that xylem conduits were extremely vulnerable to cavitation. However, Cochard et al. (2000) showed that the technique was flawed by cavitation build-up during sample preparation, and that the vessels were actually far more resistant to cavitation. More recently, Li et al. ( 2008) used a centrifuge technique to measure cavitation resistance in ringporous species and found extremely vulnerable xylem conduits, but Cochard et al. (2010) and [START_REF] Choat | Measurement of vulnerability to water stress-induced cavitation in grapevine: a comparison of four techniques applied to a long-vesseled species[END_REF] have since provided experimental evidence for bias in these centrifuge techniques which greatly overestimate the vulnerability of species with long vessels.

The good agreement between the centrifuge and airinjection techniques has been used as an argument to demonstrate the reliability of both techniques (Li et al. 2008). However, it is equally possible that both techniques are vitiated by the same artefact. The objective of our study was to provide a more extensive test of the reliability of the double-ended pressure sleeve technique (Cochard et al. 1992a, Salleo et al. 1992[START_REF] Sperry | Intra and inter-plant variation in xylem cavitation in Betula occidentalis[END_REF]. We tested the hypothesis that sample vulnerability was biased by the presence of vessels cut open inside the pressure sleeve. Therefore, we analyzed VCs obtained with pressure sleeves of different sizes on stem samples of different lengths for three tree species presenting contrasting vessel lengths.

Materials and methods

Plant material

Experiments were conducted on different tree species from the INRA-Crouël campus in Clermont-Ferrand (central France). Three species with contrasting maximum vessel lengths were selected for this study. The air infiltration technique (Ewers and Fisher 1989) was used to measure maximum vessel lengths (L, m). Oak (Quercus robur L.), a ring-porous species, had very long vessels (L = 1.34 m, SD = 0.38, n = 6), while birch (Betula pendula Roth), a diffuse-porous species, had very short vessels (L = 0.16 m, SD = 0.04, n = 6) and peach (Prunus persica (L.) Batsch) offered vessels with intermediate length (L = 0.42 m, SD = 5.8, n = 6). Shoots longer than maximum vessel length were cut in the morning and brought to the laboratory where they were analyzed later the same day. Experiments were conducted on non-ramified terminal shoots less than 3 years old.

Vulnerability curves

The VCs were determined using the double-ended pressure sleeve method according to Cochard et al. (1992a) and [START_REF] Sperry | Intra and inter-plant variation in xylem cavitation in Betula occidentalis[END_REF]. The principle of the technique is to clamp a special pressure chamber on a branch segment, increase the air pressure in the chamber and measure the effect on branch conductance. Cochard et al. (1992a) demonstrated that for Populus and Salix, the dependence of xylem conductance on positive air pressure was similar to the dependence of xylem conductance on negative sap pressure. For the purpose of this study, we constructed three pressure sleeves of different lengths. The sleeves were made with 2.5-cm diameter steel tubes. Compression fittings were placed at both tube ends and rubber corks were used to seal the sleeves. The portion of the shoot segment in contact with compressed air inside the chambers was respectively 3.5, 17 and 27.5 cm.

Following Cochard et al. (1992a), hydraulic conductance of the sample was measured by connecting one sample end to vertical plastic tubing filled with a filtered solution (0.2 μm) of 20 mM KCl and 1 mM CaCl 2 in ultrapure water. The water pressure, P, in the tube was adjusted to 6 kPa. The plastic tube was large enough (2 cm diameter) to allow the air bubbles coming out of the cut end to escape freely during pressurization. This system enabled continuous measurement of water flux, F, through the branch segment while the air pressure inside the chamber was gradually increased. Water flow through the sample was measured gravimetrically by collecting the effluent from the distal end in a preweighed cotton collector enclosed in a plastic tube over 1-min intervals. Sample conductance, K, was calculated as: K = F/P. Before being inserted in the pressure chamber, samples were first flushed with the same solution for 30 min at 0.15 MPa to remove any embolism that may have formed during sample preparation. Preliminary experiments with Betula (see the section on Results) indicated that it was necessary to remove sample bark inside the pressure sleeve to induce embolism in the stem.

The VCs were constructed as follows. First, air pressure in the chamber was increased to 0.1 MPa and maximum sample conductance, K max , was measured. Then, the pressure in the chamber was increased in 0.5 MPa steps, and sample conductance, K, was determined at steady state at each step. The loss of hydraulic conductance, PLC, at each pressure was calculated as:

PLC = 100(K max -K)/K max

Test experiments

To analyze the effect of sample length on VCs obtained using this double-ended pressure sleeve method, we constructed VCs with 17.5-, 27.5-and 37.5-cm long samples for each species. For Prunus and Quercus, we also ran a test with the 3.5-cm long pressure chamber using shoots longer than their maximum vessel length, i.e. 57.5 cm for Prunus and 150 cm for Quercus.

To analyze the effect of pressure chamber length, we measured 37.5-cm long shoots of all three species in all three different pressure chambers. For each experiment, we averaged the results of three to five replicates. 

Reference VCs

Reference VCs using the bench-drying technique [START_REF] Sperry | A method for measuring hydraulic conductivity and embolism in xylem[END_REF]) have previously been published for Quercus (Cochard et al. 1992b), Betula (Cochard et al. 2005) and Prunus (Cochard et al. 2010). The reference curves for Betula and Prunus were constructed with the same plant material as that used in this study.

Results

Increasing air pressure in the pressure sleeve decreased stem conductance in all species and all treatments. However, embolism could only be induced after previously removing bark from inside the chamber (Fig. 1).

Segment length influenced the shape of VCs, but the results contrasted strongly across species (Fig. 2). For Betula, a short-vessel species, the results were similar across treatments and in good agreement with the reference VC for this species. In contrast, for Prunus and Quercus, segments appeared less vulnerable at increasingly high lengths. For Prunus, VCs obtained with samples longer than maximum vessel length were in agreement with the reference VC, whereas for Quercus, the curves established with the longest segments (1.5 m) still strongly overestimated xylem vulnerability.

Length of the pressure chamber also influenced the shape of the VCs (Fig. 3). Again, the effects were small in Betula but more substantial in species with longer vessels, where increasing the length of the pressure chamber decreased sample vulnerability. For Prunus, VCs constructed with the shortest chamber were in close agreement with the reference VC. For Quercus, even the shortest chamber strongly overestimated the xylem vulnerability of this species.

Discussion

The reliability of the techniques for measuring xylem vulnerability to cavitation has been the subject of much debate. A critical aspect in this discussion is to identify a reference methodology, i.e. a method capable of producing VCs similar to the dependence of xylem embolism on xylem pressure measured in situ and in planta. Such 'native' curves have been obtained rarely [START_REF] Bréda | Field comparison of transpiration, stomatal conductance and vulnerability to cavitation of Quercus petraea and Quercus robur under water stress[END_REF], Cochard et al. 1996[START_REF] Cochard | Use of positive pressures to establish vulnerability curves[END_REF]) because of obvious experimental constraints. Dehydrating cut branches on a bench instead of working with whole plants in situ considerably speeds up the construction of VCs. It has been experimentally demonstrated that this procedure does not alter the reliability of the curves [START_REF] Bréda | Field comparison of transpiration, stomatal conductance and vulnerability to cavitation of Quercus petraea and Quercus robur under water stress[END_REF], Cochard et al. 1996[START_REF] Cochard | Use of positive pressures to establish vulnerability curves[END_REF], which also suggests that the faster rate at which plants are dehydrated ex situ has little impact on the cavitation process. Therefore, we can assume the benchdrying method to be reliable. However, this technique remains laborious and time consuming, which explains why other methodologies have been developed. The double-ended pressure sleeve technique offers an attractive alternative as it enables VCs to be constructed quickly and with limited plant material, and has consequently become a routine technique for cavitation studies in many laboratories worldwide. In a recent literature survey, we estimated that one in four of all the VCs published to date were constructed based on this technique (Choat et al., unpublished data). Our study suggests that this technique has strong limitations and should probably be used more cautiously.

Methodological difficulties associated with airinjection techniques have already been reported in the past. For instance, [START_REF] Sperry | Intra and inter-plant variation in xylem cavitation in Betula occidentalis[END_REF] recommended notching the xylem inside the chamber to provoke embolism in Betula. Our results on Betula confirm that the xylem has to be directly exposed to the pressurized air inside the chamber before cavitation can be induced. We did not test here whether different ways of exposing xylem conduits had an impact on VCs. This finding suggests that bark can form a relatively air-tight barrier isolating xylem conduits from air in the pressure chamber. In this situation, the air pressure at the contact with the xylem vessels equilibrates with the pressure in the chamber, with the result that the VCs are biased. The bark isolation problem appears to be specific to this pressure sleeve technique. Indeed, with bench dehydration or centrifugation techniques, the air pressure inside the xylem is at equilibrium with the atmospheric pressure, whatever the negative pressure in the xylem lumens. We do not know whether bark removal is an appropriate procedure for other species. This is a first point of concern that should be more carefully evaluated whenever this technique is employed.

The second point highlighted in this study is the strong influence of sample length and chamber length on VCs. As a rule, the longer the sample and the shorter the chamber, the closer the curves fit the reference VCs. However, the patterns differed strongly across species, and a dependence on xylem anatomy can be hypothesized. [START_REF] Choat | Measurement of vulnerability to water stress-induced cavitation in grapevine: a comparison of four techniques applied to a long-vesseled species[END_REF] recently reported that in Vitis, a long-vessel species, VCs established on short segments greatly overestimated xylem vulnerability. However, working with segments as long as vessel length gave more reliable curves. Our data confirm this result, and further demonstrate that maximum vessel length is a key parameter for the reliability of the double-ended pressure sleeve technique. For species having very short vessels, like Betula, our curves were always in good agreement with the reference VCs, whatever the chamber or sample length. In contrast, all the VCs obtained on Quercus strongly overestimated the cavitation resistance of this ring-porous species. For Prunus, which has intermediate vessel length, the curves were only in agreement with the reference VC when segments were longer than vessel length, and only with the smallest chamber.

To account for the different effects of sample, chamber and vessel lengths on VCs, we computed the following index I: I = (sample lengthchamber length)/(vessel length)

Figure 4 shows how the ratios between sample P50 and reference P50 vary with I. The result of this very simple computation suggests that when (sample lengthchamber length) is higher than maximum vessel length, the P50 converges toward the reference P50 value. This condition was sufficient for Betula, Prunus and Vitis, the species studied by [START_REF] Choat | Measurement of vulnerability to water stress-induced cavitation in grapevine: a comparison of four techniques applied to a long-vesseled species[END_REF]. However, for Quercus, this condition was not satisfactory as the P50 were still overestimated. This is possibly because of an underestimation of vessel length for this species, as the pressure chamber was mounted in the middle of the branch where vessels are probably much longer than in the terminal part of the shoot [START_REF] Cochard | Xylem dysfunction in Quercus: vessel sizes, tyloses, cavitation and seasonal changes in embolism[END_REF]. Clearly, VCs constructed with this technique using samples shorter than maximum vessel length can greatly overestimate species vulnerability to cavitation. The same conclusion was recently reached with an independent method base on centrifugal forces (Cochard et al. 2010). Therefore, a good agreement between the centrifugation and air-injection techniques does not provide a sound cross-validation of each of the two techniques. Further investigations are required in order to understand why vessels cut open are also experimentally more vulnerable to cavitation with the double-ended pressure sleeve technique.

In conclusion, VCs constructed with the double-ended pressure sleeve method can strongly overestimate xylem cavitation when samples are shorter than the species' maximum vessel length. The overestimation is further exacerbated with long pressure sleeves. Within these methodological restrictions, the double-ended pressure sleeve technique can give reliable results for conifers and diffuse-porous angiosperms but probably not with most of the ring-porous angiosperms. The apparent very high vulnerability of ring-porous species reported in recent publications based on these techniques should be reconsidered in light of the findings presented here and in Cochard et al. (2010).

CONSIDERAÇÕES FINAIS

A água demonstrou ter um papel fundamental durante a dormência, principalmente no período que antecede a brotação. As conclusões realizadas para cv. Packham's pode ser estendida, talvez, para um comportamento generalizado das Apesar de a técnica ser eficiente, existem dados diários que devem ser filtrados manualmente. Devido ao volume de dados gerados, esta filtragem tornou-se muito trabalhosa e difícil. Sendo assim, deixa -se a sugestão de ao delinear o experimento, deve determinar o mínimo de plantas a serem utilizadas na utilização desta técnica.

No caso deste experimento em que utilizamos a determinação do fluxo de seiva pelo método de balanço de calor, o qual foi conduzido ao nível de campo, sem proteções contra adversidades do tempo, sugerimos que as plantas alocadas em vasos sejam fortemente fixadas em arames para que não ocorra o tombamento através do vento ou tempestades ou mesmo de animais silvestres ou domésticos.

Animais silvestres, como os roedores, entre eles coelhos e ratos, podem roer os cabos de leitura, ocasionando perda de dados, porém facilmente perceptíveis. Em nosso experimento, após detectarmos este problema, utilizamos uma cerca elétrica de 0,5 m de altura em torno de todo o experimento.

No experimento que verificamos utilizamos a técnica de injeção de ar em ramos para determinação da vulnerabilidade à cavitação observamos que o uso desta técnica, apesar de gerar dados lentamente, mostra -se segura e confiável. O equipamento relativamente é básico e de baixo custo, diferente das outras metodologias. No entanto, é preciso vários ensaios e se utilizar de dados de outras metodologias para determinar as curvas de vulnerabilidades.

Nesta técnica, é preciso aferir a massa de um tubo com algodão a cada um minuto da água coletada na extremidade do ramo. Logo, para espécies em que os vasos do xilema são largos, (ex. pessegueiro), esta aferição pode ser substituída por outras metodologias, como recuperar o ar que sai de umas das extremidades do ramo, e direcioná-lo para um tubo de vidro milimetrado em forma de 'U' semi cheio com solução colorida (ex. azul, vermelho ou verde). Este direcionamento do ar irá fazer com que a coluna de solução no interior do tubo se desloque, tendo assim uma medida de deslocamento a cada pressão em que o ramo foi submetido, podendo substituir os dados gerados pela massa do tubo. O conhecimento dos processos fisiológicos, tanto na fase de repouso quanto no desenvolvimento vegetativo, é import ante na adaptação das angiospermas lenhosas de clima temperado, especialmente na questão da gestão da água pela planta. Os objetivos deste trabalho foram avaliar o conteúdo da água e o metabolismo de carboidratos durante o progresso da dormência em pereiras, avaliar estratégias do uso da água em duas espécies lenhosas (macieira e nogueira), que foram submetidas a três níveis de déficit hídrico, e por fim, avaliar a confiabilidade da técnica de injeção de ar para indução à cavitação em três espécies de angiospermas lenhosas. The knowledge of physiological processes during both dormancy and vegetative growth is important for adaptation processes in temperate zone woody angiosperms, especially in water management by those plants. The objectives of this work were to evaluate the water content and carbohydrate metabolism during the progress of dormancy in pears, to evaluate strategies of water use in two woody species (apple and walnut), which were subjected to three different levels of water deficit, and also to evaluate reliability of air injection technique to induce cavit ation in three woody angiosperms. The first experiment was conducted during aut umn and winter of 2008 in Brazil, and it was used plants of pears cultivars Packham's Triumph and Housui. The second study was carried out during the summer season of 2009 in France, with apple and walnut trees under water stress. The third experiment was done in France in 2009, and three species of woody angiosperms with different lengths of xylem were used Betula pendula, Prunus persica and Quercus robur. From the results it was concluded that the water cont ent in tissues might be a marker of dormancy progression for c v. Packham's Triumph. However, the data were not conclusive and clear in c v. Housui. Stomatal closure might be an important parameter for preventing xilemian cavitation in walnut and apple trees subjected to soil water deficit. Apple trees stomata grown under severe drought regime remained partially open, indicating a greater tolerance of this species to drought in comparison to walnut. Finally, the doubleended pressure sleeve technique is reliable for species with diffuse -porous xylem by using short chambers and also branches longer than the xylem vessels. Keywords: Pyrus spp. Malus domestica. Juglans regia. Prunus persica. Betula pendula. Quercus robur. Water. Cavitation. Xylem. Carbohydrate. Dormancy. Development.

  CONSIDERAÇÕES FINA IS ................................................................................................ 68 Resumo ................................................................................ Erro! Indicador não definido. Abstract................................................................................. Erro! Indicador não definido.

  vegetal O experimento foi conduzido em pomares experimentais localizados em São Joaquim/SC (28°17'S, 49°55'O, 1353 m de altitude) e Vacaria/RS (28°30'S, 50°56'O, 971 m de altitude), Brasil. Cinco plantas de pereiras de cada cultivar e local foram utilizadas, sendo, cv. Packham's Thriumph (Pyrus communis) com exigência de frio de 1200 horas ≤ 7,2°C (NAKASU et al., 2007) e cv. Housui (Pyrus pyrifolia [Burrn] Nak.) que apresenta, em média exigência em frio de aproximadamente 720 HF (FAORO, 2001). O pomar em São Joaquim/SC foi implantado em 2000 e o de Vacaria/RS em 1993, para ambas cultivares. As pereiras foram conduzidas em forma de líder central, as quais não sofreram qualquer intervenção química ou física durante o período do experimento, de maio a setembro de 2008. Foram retirados de cada planta aleatoriamente oito ramos de cada planta de um ano com 40 cm ± 5 cm de comprimento em seis datas distintas (23/05; 14/06; 05/07; 26/07; 16/08 e 03/09 de 2008), provenientes da parte externa da copa e da altura mediana da planta. Os ramos coletados foram acondicionados em uma caixa térmica com gelo até o processamento das amostras. Foram utilizados cinco ramos para determinação do tempo médio de brotação (TMB) e três ramos para determinação do conteúdo de carboidratos (CC) e de água (CA). Para determinação do CC e CA as amostras foram divididas em duas partes, lenho e gema+base da gema (Fig. 1).

Figura 3 :

 3 Figura 3: Tempo médio de brotação (TMB), durante o período de maio a setembro

Figura 4 :

 4 Figura 4: Conteúdo de açúcares solúveis totais (AST) na base+gema (A, B) e no

  que o conteúdo de amido nas gemas apresentou dinâmica semelhante, a qual consistiu em estabilização até 05/jul seguido de aumento até a última análise, correspondente a aproximadamente 45,6% para a cv. Packham's Triumph e de 53,1% para a cv. Housui em relação a 5/jul (Fig. 5A e 5B).

Figura 5 :

 5 Figura 5: Conteúdo de amido na base+gema (A, B) e no lenho (C, D), durante o

Figura 6 :

 6 Figura 6: Conteúdo de água na base+gema (A, B) e no lenho (C, D), durante o período de maio a setembro de 2008 em São Joaquim/SC (•) e Vacaria/RS (○), nas cvs. Packham's (A, C) e Housui (B, D). Médias ± EP (n=3).

  Vacaria/RS. O aumento no TMB observado em 26/jul em Vacaria/RS na cv. Housui estaria relacionada com as flutuações térmicas daquele período, ou seja, temperaturas máximas acima de 20°C durante o mês de julho. De acordo com Saure (1985) e Honjo et al. (2002), a ocorrência destes dias quentes durante a dormência da pereira japonesa, acima de 25°C, pode retardar a brotação mais do que as oscilações das temperaturas ao longo do inverno. Herter (1992) descreve que o retorno de frio intermitente logo após um período longo de temperaturas altas ocasiona aumento na profundidade da dormência. Baseado nesta informação observou-se que para a cv. Housui, isto procedeu de forma clara (Fig. 2B) em 26/jul para plantas cultivadas em Vacaria/RS. No caso da cv. Packham's Triumph as elevadas temperaturas ocorridas em Vacaria/RS parecem não ter influenciado o progresso da dormência. Entretanto, o menor acúmulo de frio ocorrido em Vacaria/RS demonstrou que o TMB é superior quando comparado as plantas cultivadas em São Joaquim/SC (

  ) em ambos tecidos, cultivares e locais de cultivo, indicando que houve consumo dos AST nesta fase. Em contrapartida, nesta mesma data ocorreu um aumento no acúmulo de amido no lenho, fortalecendo a hipótese de Beck e Ziegler (1989), que afirmou que as concentrações de amido e de TSS obedecem um padrão inverso durante a dormência. Esta interconversão pode ser observado neste estudo, como foi observado por Yamamoto (2010) com pereira cv. Housui e Carvalho (2001) com macieira. A não degradação do amido e o aumento nos ramos neste trabalho após 05/jul seria provocada pela falta de frio durante o inverno , a reconversão dos AST[START_REF] Leite | Evolution des états des bourgeons et de leur hétérogénéité le long du rameau d'un an de pêcher sous différents régimes de températures après l'installation de l'endodormance[END_REF] e/ou devido ao aumento na demanda de carbono para a manutenção da respiração basal e da atividade metabólica das gemas[START_REF] Marafon | Chilling privation during endodormancy period disturbs carbohydrate mobilization in Japanese pear[END_REF].O aumento na concentração dos AST nas gemas pode estar associado com a diminuição dos conteúdos de açúcares e amido nos tecidos de reserva, para a sustentação dos processos de floração e brotação, conforme observado porBonhomme et al. (2005), ocorreu neste experimento até 05/jul (Fig.4 e 5).[START_REF] Leite | Evolution des états des bourgeons et de leur hétérogénéité le long du rameau d'un an de pêcher sous différents régimes de températures après l'installation de l'endodormance[END_REF] verificaram que em ramos de pessegueiro mantidos sob condições naturais, com satisfação plena do requerimento em frio, apresentaram aumento nos conteúdos de hexoses e amido nas gemas, ocorrendo o contrário sob plantas privadas de frio hibernal.[START_REF] Honjo | Effect of intermittent warm periods on bud break and carbohydrate contents of japanese pear (Pyrus pyrifolia Nakai) at different endodormancy stages[END_REF], ao colocar plantas de pereiras japonesas sob condições de acúmulo de 1000 HF e seguido de 7 dias de forçagem em temperaturas superiores a 20°C, os AST (glicose e frutose) diminuíram, porém houve um aumento expressivo no conteúdo de amido. Isso também explica os aumentos expressivos de amido após 05/jul no ramos tanto da cv. Packham's Triumph como da cv. Housui.Os eventos ocorridos a partir de 5/jul também coincidem com as principais mudanças no CA, cujas gemas apresentaram os teores mais elevados nos dias que antecederam a superação da dormência (brotação). A translocação da água das gemas para o lenho observado em 5/jul na cv. Housui pode estar associado com hipótese de que isto ocorreu com finalidade da preservação da região meristemática[START_REF] Erez | Changes in water status in peach buds on induction, development and release from dormancy[END_REF][START_REF] Carvalho | Dinâmica da dormência e do conteúdo de carboidratos e proteínas em gemas vegetativas e ramos de um e dois anos de macieira com ou sem frio suplementar[END_REF]. Na cv. Packham's Triumph, o aumento do CA ocorrido em 26/jul pode ser explicado pelo aumento do TSS no período anterior na gema e com retomada do crescimento. Nos vasos do xilema pode ter havido aumento do potencial osmótico da seiva, gerando uma pressão interna que permite o restabelecimento da condutividade hidráulica dos vasos, conforme observado por[START_REF] Cottignies | Potentiel osmotique et potentiel hydrique du bourgeon terminal de frenê, au cours du cycle annuel[END_REF]) e Gévaudant et al. (2001).

  plantas foram cultivadas durante os meses de julho e agosto em condições climatológicas naturais no INRA-PIAF, UMR#547 em Clermont-Ferrand na França (45°77'N, 3°14'E). Durante o experimento foi mensurada a radiação fotossinteticamente ativa (PAR) usando um sensor LI-190SA (LiCor Inc., NE, USA) a 1 m de altura. Três sensores de temperatura foram instalados a sombra. As médias para ambos os parâmetros foram calculadas para um intervalo de 10 minutos.

  Na Fig. 1 é apresentado o método indicando as medidas térmicas (watts). O princípio do método consiste na aplicação de um pequeno fluxo constante de calor (W) no segmento do tronco através de uma jaqueta térmica. Foi quantificado o calor nos fluxos condutivos axias (Qc e Qb), assim como os radiais (QI) e na variação de armazenamento (Qa) segundo o volume do segmento de tronco que foi aquecido. A dissipação do calor pela seiva (Qs) é calculado como termo residual do balanço de calor com o fluxo volumétrico da seiva, (ROJAS, 2003).

Figura 1 :

 1 Figura 1: Esquema do princípio do método de balanço de calor e do sensor para

(

  

Figura 4 :

 4 Figura 4: Fluxo de seiva diário de nogueiras submetidas a três ciclos diferentes de déficit hídrico no solo ( __ ) e sem déficit hídrico no solo ( __ ). Radiação fotossinteticamente ativa máxima diária ( __ ). RH: Reidratação.

Figura 5 :

 5 Figura 5: Condutância estomática (gs) vs potencial hídrico do xilema sobreposta nas

Fig. 1 .

 1 Fig. 1. Effect of bark removal on Betula xylem VCs obtained with the double-ended pressure sleeve technique. The wood should be in direct contact with compressed air in the chamber before embolism can be induced. Vertical bars = ± SE.

Fig. 2 .

 2 Fig. 2. Effects of sample length on xylem VCs obtained with the doubleended pressure sleeve technique (white symbols) for three woody species (different panels). The length of the pressure sleeve was constant (3.5 cm). VCs obtained with a reference technique are shown with closed symbols. Vertical bars = ± SE.

Fig. 3 .

 3 Fig. 3. Effects of pressure sleeve length on xylem VCs obtained with the double-ended pressure sleeve technique (white symbols) for three woody species (different panels). Sample length was constant across species and treatments (37.5 cm). VCs obtained with a reference technique are shown with closed symbols. Vertical bars = ± SE.

Fig. 4 .

 4 Fig. 4.Combined effect of sample length and pressure sleeve length on xylem pressure provoking a 50% loss of conductance (P50). The x-axis represents the ratio between sample length minus pressure sleeve length and the maximum vessel length of the species. The y-axis is the ratio between P50 and the P50 value of the reference curve for each species. The values for Vitis are estimated from the data presented in[START_REF] Choat | Measurement of vulnerability to water stress-induced cavitation in grapevine: a comparison of four techniques applied to a long-vesseled species[END_REF]. Vertical bars = ± SE.

  pereiras européias. Dados (não publicados) para cv. Williams cultivadas nos mesmos locais foram muito similares à cv. Packham's. Durante o experimento relacionado ao conteúdo de água nos tecidos em pereiras durante o ano 2008, observamos que apesar de funcional, a técnica utilizada para determinação do conteúdo de água pode sofrer alterações que comprometeram a fidelidade dos dados, caso precauções não sejam tomadas. Ao longo do ano de 2007 efetuamos diversos testes para determinação deste parâmetro. Verificamos que o material vegetal deve ser coletado sempre no mesmo horário e de ramos protegidos do sol, ou seja, ramos localizados mais internamente na copa. Ramos expostos ao sol podem ter desidratações severas que não condizem com o estado real da planta. Outro fator a ser considerado, são as precipitações que ocorrem horas antes ou durante a coleta. As determinações são alteradas, invalidando os dados coletados. A solução para este problema utilizando esta metodologia está em não coletar o material e aguardar o tempo apropriado para coleta. Outra questão está na distância do local do experimento até o local de processamento das amostras. Em nosso caso verificamos que os ramos acondicionados em sacos plásticos pretos imediatamente após coleta e colocados em caixas de térmicas com gelo não alteram os valores originais após 11h de viagem.O número de amostras para determinações de açúcares através da metodologia da utilização da antrona deve ser bem elaborado, visto que a demanda de material laboratorial e do tempo relativamente é grande. Apesar do custo baixo das determinações, a utilização do ácido perclórico é regulamentado pelo exército brasileiro, sendo que o laboratório de Fisiologia Vegetal da Embrapa Clima Temperado tem autorização de compra de somente 3 litros anuais. Caso o delineamento do experimento não prever esta situação e as amostras demandarem um total superior a 3 litros, os dados não poderão ser determinados com esta metodologia.Estudos com o conteúdo de água nos tecidos de angiospermas plantas lenhosas durante a dormência iniciaram desde 1983, no entanto somente em 2007 foram publicados resultados através de tecnologias de ponta, através do uso da ressonância magnética. Tal tecnologia ainda determina a região do tecido de maior concentração de água. Perspectivas para estes estudos poderão serem feitas com uso de metodologias mais precisas para determinação da conteúdo de água nos tecidos.O método de balanço de calor para determinação do fluxo de seiva é simples, porém necessita de medidas de técnicas complexas. Se algum problema acontecer em uma delas, a estimativa é invalidada. Dois problemas ocorreram durante o período que antecedeu o experimento, o qual chamamos de período de adaptação das plantas e equipamentos. O primeiro diz respeito à 'poluição eletromagnética' proveniente da rodovia localizada a 100 m do experimento, onde solucionamos com a instalação de resistores de 0,5 ohm em cada cabo de dados antes da entrada no datalogger. Neste experimento foram instalados sensores de determinação da variação do diâmetro do caule, os quais os dados não puderam ser aproveitados devido a tal poluição.A queda de energia na unidade também afetou a aparelhagem usada para determinação. Problemas de aterramento de cabos de energia ocorreram quando a energia foi restabelecida. Estes problemas foram os grandes contratempos para se pudesse iniciar o experimento, visto que, levou um determinado tempo para localizar a razão dos problemas. Outro fator a ser considerado é o volume de dados que serão gerados. Neste experimento utilizamos 12 plantas, o que nos demandou um datalloger com 64 canais. A coleta de dados realizadas a cada 24 horas gerava 1440 linhas x 64 colunas de dados no software utilizado. Durante o período do experimento (27 julho a 24 agosto) gerou um total de 40320 linhas x 1792 colunas.

A

  seguir listamos os principais pontos que merecem ser pesquisados para esclarecer algumas das interrogações provenientes deste trabalho:  Metodologias mais avançadas para estudos da dinâmica da água em plantas lenhosas durante a dormência;  Estudar a variabilidade genética intra e inter específicas das plantas lenhosas referente à resistência à cavitação;  Identificar genótipos de maior desempenho em face às restrições hídricas;  Aprimorar o uso das técnicas para determinação de curvas de vulnerabilidade à cavitação para diversas espécies de plantas lenhosas, tanto angiospermas quanto gimnospermas. RESUMO SIMÕES, Fabiano. Parâmetros hídri cos em angiosperma s lenhosa s de clima temperado durante os estádios de repouso e cre scimento. 2011. 80f. Tese (Doutorado) -Programa de Pós-Graduaç ão em Fisiologia Vegetal. Universidade Federal de Pelotas, Pelotas/RS, Brasil e École doctorale des Sciences de la Vie, de la S anté, Agronomie, Environnement de l'Université Blaise Pascal, Clermont-Ferrand, França.

  No primeiro experimento, conduzido durante o outono e inverno de 2008 no Brasil, utilizou-se plantas de pereira cultivares Hous ui e Packham´s Triumph. O segundo experimento foi desenvolvido na França durante o verão de 2009, com macieiras e nogueiras sob estresse hídrico. O terceiro experiment o foi conduzido na Franç a em 2009 com três es pécies de angiospermas lenhos as com diferentes comprimentos dos vasos do xilema, Betula pendula, Prunus persica e Querc us robur. A partir dos resultados concluiu-se que o conteúdo de água nos tecidos pode ser um marcador do progresso da dormência para c v. Packham's Triumph. Porém os dados não foram conclusivos para c v. Housui. O fec hamento estomático pode ser um importante parâmetro na prevenção à cavit ação xilemática em nogueiras e macieiras submetidas a déficit hídrico no solo. Em regime de secas severas, a macieira mantém os estômatos parcialmente abertos, indicando maior tolerância desta espécie à sec a quando comparado à nogueira. E por fim, a técnica de injeção de ar utilizando câmara de ar com duas saídas é fiável para espécies com xilema de porosidade difusa, utilizando câmaras curtas e amostras de ramo que tenha comprimento superior aos vasos do xilema. Palavras-chave: Pyrus spp. Malus domestica. Juglans regia. Prunus persica. Betula pendula. Quercus robur. Água. Cavitação. Xilema. Carboidratos. Dormência. Desenvolvimento. ABSTRACT SIMÕES, Fabiano. Water parameters in temperate zone woody angiosperms during the dormancy and growth stage s. 2011. 73f. Thesis (Doctor of Sciences) -Programa de Pós-Graduaç ão em Fisiologia Vegetal. Universidade Federal de Pelotas, Pelotas/RS, Brazil and École doctorale des Sciences de la Vie, de la S anté, Agronomie, Environnement de l'Université Blaise Pascal, Clermont-Ferrand, France.

  

Annual Review of Plant Physiology and Plant Molecular Biology, Palo

  , E.; MOTOMURA, Y.; UNRATH, R. Influence of root temperature during dormancy on respiration, carbohydrates, and growth resumption in apple and peach.

	AGRADECIMENTOS
	Journal of the American Society for Horticultural Science, Alexandria, v.112,
	À Embrapa Clima Temperado pelo financiamento do projeto e a Empresa de p.514-519, 1987.
	Pesquisa Agropecuária e Extensão Rural de Santa Catarina -Epagri, pela
	disponibilidade dos pomares em São Joaquim/SC. À Doutoranda em Agronomia da
	UFPel, Carine Cocco, pela colaboração nas determinações dos carboidratos.
	CAPÍTULO 2
	RELAÇÃO ENTRE O FECHAMENTO ESTOMÁTICO E A INDUÇÃO À
	Alto, v.40,
	p. 95-117, 1989.
	BONHOMME, M.; RAGEAU, R.; GENDRAUD, M. Influence of temperature on the
	Triumph, quando cultivadas em locais com acúmulo de horas de frio contrastantes e dynamics of ATP, ADP and non-adenylic triphosphate nucleotides in vegetative and
	a ocorrência de frio influencia o deslocamento da água na gema. Temperaturas floral peach buds during dormancy. Tree Physiology, Oxford, n. 20, p.615-621,
	máximas intermitentes acima de 20°C seguidas de frio intenso restabelecem a 2000.
	dormência e retardam a brotação na cv. Housui. BONHOMME, M.; RAGEAU, R.; GENDRAUD, M.; LACOINTE, A. Influences of cold

crescimento, desde que não haja grandes flutuações térmicas (temperaturas elevadas). Entretanto, esta hipótese não pôde ser verificada na cv. Housui. A água demonstra ter uma forte ligação no progresso da dormência e na dinâmica de carboidratos mais clara para cv. Packham's Triumph do que na cv. Housui. Altas temperaturas durante a dormência alteram a dinâmica de água na cv. Packham's REFERÊNCIAS AMÉGLIO, T.; LACOINTE, A.; COCHARD, H.; ALVES, G.; BODET, C.; VANDAME, M.; VALENTIN, V.; SAINT-JOANIS, B.; PLOQUIN, S.; CRUIZIAT, P.; JULIEN, J.L.; GUILLIOT, A.; PETEL, G. Water relations in walnut during winter. Acta Horticulturae, Amsterdam, v.544, p.239-246, 2001. BALANDIER, F. Etude dynamique de la croissance et du developpement des bourgeons de quelques cultivars de pecher: Cultivés à diverses altitudes sous Le climat tropical de l'Ile de la Réunion 1992. 162 p. Thèse (Doctorat) -Ecole Doctorale des Sciences de la Vie et de la Santé, Université Blaise Pascal, Clermont-Ferrand. BECK, E.; ZIEGLER, P. Biosynthesis and degradation of starch in higher plants deprivation during dormancy on carbohydrate contents of vegetative and floral primordia and nearby structures of peach buds (Prunus persica L. Batch) Scientia Horticulturae, Amsterdam, v. 105, p. 223-240, 2005.

YOUNG

CAVITAÇÃO SOB ESTRESSE HÍDRICO EM FRUTÍFERAS LENHOSAS

RESUMO -As plantas lenhosas adotam diferentes estratégias do consumo da água em função do déficit hídrico. O objetivo deste trabalho foi investigar estratégias, em duas espécies (macieira e nogueira), submetidas a três níveis de déficit hídrico no solo [≈ 0% (severo), ≈ 50% (moderado) e ≈ 75% (fraco)] em comparação à transpiração controle. O fluxo de seiva ao nível do tronco foi monitorado diariamente através do método de balanço de calor, juntamente com a umidade do solo utilizando uma sonda TDR. Medidas diárias da condutância estomática (gs) e potencial hídrico mínimo do xilema ( min ) foram realizadas durante horário zenital do sol. Foram determinadas as curvas de vulnerabilidade à cavitação através da porcentagem da perda da condutividade hidráulica. O fechamento estomático demonstrou ser um importante parâmetro na prevenção à cavitação xilemiana em nogueiras e macieiras submetidas a déficit hídrico no solo, visto que coincidiu com a indução da cavitação primordial (P 12 ). Esta situação impediu o desenvolvimento de tensões abaixo do P 12 . No entanto, sob regime de secas severas a macieira manteve os estômatos parcialmente abertos, indicando maior tolerância desta espécie à seca quando comparado à nogueira.

Palavras-chaves: Malus domestica Borkh. Juglans regia L. Embolia. Transpiração. Estômato.

RELATIONSHIP BETWEEN

STOMATAL CLOSURE AND THE INDUCTION CAVITATION UNDER WATER STRESS IN FRUIT WOODY ABSTRACT:

  It is suggested that woody plants adopt different strategies to use water before the drought. The aim of this study was to investigate these strategies in two species (apple and walnut), subjected to three levels of soil water deficit [≈ 0% (high), ≈ 50% (mediun) and ≈ 75% (low)] in comparison to control transpiration. The sap flow at the stem was monitored daily by the method of heat balance, along with soil moisture by using a TDR probe. Daily measurements of stomatal conductance (gs) and minimum xylem water potential ( min ) were performed during time Zenith of the sun. Vulnerability curves for cavitations by the loss of hydraulic conductivity were determined. Stomatal closure demonstrated to be an important parameter for preventing cavitations in the xylem in both walnut and apple trees subjected to soil water deficit, which coincided with induction of primary ca vitation (P 12 ). This situation prevented development of xylem tensions below P 12 . However, even under severe drought conditions, the stomata remained partially opened in apple trees, indicating a higher level of tolerance in this specie when compared to walnut trees.

	A abertura estomática é regulada por repostas fisiológicas, as quais estão
	1 INTRODUÇÃO envolvidas na mecânica do movimento estomático (ZEIGER et al., 1987). Essas
	O déficit hídrico é causa freqüente de estresse nas plantas (KRAMER e repostas podem ser vistas como uma indicação dos diferentes mecanismos de
	BOYER, 1995). Durante a estação de crescimento, a seiva circula sob tensão nas controle da respiração das plantas lenhosas. Ladjal et al. (2004) descrevem que a
	plantas. Assim, as colunas de água formadas por este transporte podem ser sincronização do fechamento estomático e perda da condutividade hidráulica
	interrompidas quando a tensão aumenta durante o estresse hídrico, ocorrendo então durante a seca é um aspecto adicional a ser considerado em tal mecanismo.
	à cavitação e, conseqüentemente, a embolização, caracterizada pelos vasos Diversos estudos têm demonstrado que o potencial hídrico da planta induz o
	completamente tomados de ar (ZIMMERMANN, 1983). fechamento estomático e evita a cavitação no xilema em algumas espécies lenhosas
	(SPERRY e SALIENDRA
	Stomata.
	Zimmermann (1983) descreve que alta taxa de transpiração induz intensa
	abertura estomática, o que é uma conseqüência da necessidade da planta em
	manter as trocas gasosas nas folhas para a realização da fotossíntese. Entretanto,

KEYWORDS:

Malus domestica Borkh. Juglans regia L. Embolism. Transpiration.

Aparentemente, plantas lenhosas são muito diferentes entre si sob o ponto de vista hidráulico e adotam ações contrastantes em resposta ao déficit hídrico e respondem a este estresse fechando os estômatos. Este fechamento reduz a transpiração das folhas e impede o desenvolvimento de déficits excessivos de água em seus tecidos

(COCHARD et al., 2002) 

através de uma série de adaptações morfológicas, anatômicas e fisiológicas que controlam a perda de água e melhora a absorção

[START_REF] Ennajeh | Water relations and drought-induced embolism in olive (Olea europaea) varieties 'Meski' and 'Chemlali' during severe drought[END_REF]

. No entanto, a desvantagem do fechamento dos estômatos para as plantas é a redução dos ganhos de carbono que prejudicam o seu crescimento

[START_REF] Schulze | Stomatal responses to air humidity and to soil drought[END_REF]

. Portanto, o conhecimento sobre as respostas das plantas à seca e à sua base de mecanismos têm relevância para os estudos de adaptação sob diferentes condições climáticas e de programas de melhoramento genético. para manter um equilíbrio favorável da água na planta, um fluxo eficiente no xilema é necessário para substituir sua perda nas folhas.

  macieiras que foram submetidas a um déficit hídrico severo no solo,

		60				
		Tratamento Seco	Macieiras			Nogueiras
		Controle				
		50				
	Umidade do solo %	20 30 40				
		10				
		Moderado	Severo	Fraco	Moderado	Severo	Fraco
		0				
		27/Jul 31/Jul 4/aug 8/ago 12/ago 16/ago 20/ago 24/ago	27/Jul 31/Jul 4/ago 8/ago 12/ago 16/ago 20/ago 24/ago
			Data			Data
	consumiram água até um dia antes do retorno da irrigação. Em contrapartida, as
	nogueiras praticamente cessaram o consumo de água quatro dias antes do retorno

da irrigação. Esta rápida absorção de água pelas nogueiras pode estar ligada com a capacidade de absorção de água pelas raízes (KRAMER e BOYER, 1995), bem como, com a abertura estomática nas folhas, visto que ambas espécies estavam nas

Physiol.Plant. 142, 2011 

Remerciements

Acknowledgement -This work was funded in part by the PibBulles project (ANR No. 2010 Blan 1710 01).

support for the air-seeding hypothesis and implications for pressure-volume analysis. Plant Physiol 100: 205-209 Cochard H, Bréda N, Granier A, Aussenac G (1992b) Vulnerability to air embolism of three European oak species (Quercus petraea