Blütenökologisch handelt sich um Scheibenblumen mit ± verborgenem Nektar, wobei die Nektarien sich an der Basis der Staubblätter befinden. Bestäuber sind  Bienen, Hummeln, Wespen, Bombyliden sowie Syrphiden. Das Ruprechtskraut ist selbstkompatibel und es erfolgt meist Selbstbestäubung. Das Ruprechtskraut ist fakultativ autogam, es erfolgt also meist Selbstbefruchtung und Fremdbefruchtung ist die Ausnahme.