Das Vestibulum vaginae wird nach innen hin, also nach medial, vom äußeren Anteil des Hymenalrings begrenzt; nach unten, also Richtung Anus und seitlich, lateral von der sogenannten Hart-Linie oder Hartschen Linie. Sie ist makroskopisch nicht sichtbar. Sie stellt den lateralen Rand des Vestibulum vaginae dar und beschreibt (histologisch) den Übergang vom nicht-verhornten Plattenepithel zum gering verhornten Epithel. Sie führt die Grenze auf zwischen „Innen-“ und „Außenwelt“ (Endoderm und Ektoderm).